ATP熒光檢測(cè)儀操作簡(jiǎn)單,使用方便,檢測(cè)數(shù)據(jù)速度快,可輕松獲取被檢測(cè)樣品的衛(wèi)生狀況,因而深受諸多領(lǐng)域行業(yè)的歡迎,它的核心技術(shù)之一就是基于熒光素酶-熒光素體系的原理,今天我們就來(lái)了解這個(gè)“熒光"的秘密。
什么是熒光素酶和熒光素體系?
熒光素酶:
這是一類存在于多種生物中的酶,比如火螢石熒光素酶(Firefly Luciferase)。此外,還存在其他種類的熒光素酶,如海洋熒光素酶(Marine Luciferase)等。熒光素酶具有催化熒光素氧化反應(yīng)的能力。
熒光素體系:
是一種由熒光素酶(Luciferase)和熒光素(Luciferin)組成的生物化學(xué)反應(yīng)系統(tǒng)。這里的熒光素是熒光素酶反應(yīng)的底物,是一種天然存在的有機(jī)分子。
在這個(gè)反應(yīng)中,熒光素酶將熒光素底物氧化為氧化熒光素,這一氧化反應(yīng)是放射性的,因?yàn)樗尫懦隽丝梢?jiàn)光,所以是可以被測(cè)量和被記錄的。
熒光素體系的工作原理:
熒光素酶和熒光素底物以及氧氣存在的條件下,發(fā)生催化反應(yīng)。
熒光素酶將熒光素底物氧化,生成氧化熒光素,同時(shí)釋放出可見(jiàn)光。光的顏色和強(qiáng)度取決于熒光素底物和熒光素酶的類型,通常是藍(lán)綠色至黃色。
光信號(hào)可以通過(guò)熒光檢測(cè)器、熒光顯微鏡或其他光學(xué)設(shè)備來(lái)測(cè)量和記錄。
ATP熒光檢測(cè)儀正是利用了熒光素酶-熒光素體系的原理來(lái)測(cè)定ATP的含量。其工作原理可以分為以下幾個(gè)步驟:
1、取樣:從待測(cè)生物樣品中提取出ATP。
2、反應(yīng):將提取的樣品與熒光素酶、熒光素和氧氣一起混合。如果樣品中存在ATP,熒光素酶將催化ATP與熒光素發(fā)生反應(yīng),產(chǎn)生氧化熒光素和光。
3、光信號(hào)檢測(cè):檢測(cè)儀器會(huì)測(cè)量在反應(yīng)中產(chǎn)生的光信號(hào)。ATP的濃度與光信號(hào)的強(qiáng)度成正比。
4、ATP濃度計(jì)算:根據(jù)光信號(hào)的強(qiáng)度,ATP熒光檢測(cè)儀可以計(jì)算出樣品中ATP的濃度。這使得科研人員能夠準(zhǔn)確測(cè)定生物樣品中的ATP含量。
總之,熒光素體系是一種靈敏的生物化學(xué)反應(yīng)系統(tǒng),其原理簡(jiǎn)單但應(yīng)用廣泛。不僅應(yīng)用在ATP熒光檢測(cè)儀器設(shè)備中,它在生物學(xué)、分子生物學(xué)、藥物研發(fā)和生物成像等領(lǐng)域中為研究人員提供了強(qiáng)大的工具,有助于理解生物學(xué)過(guò)程和開(kāi)發(fā)新的生物醫(yī)學(xué)應(yīng)用。